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技術資訊一、技術簡介CLIP(Cross-linkingimmunoprecipitation,交聯免疫共沉淀)通過結合UV交聯和免疫共沉淀的方法來分析蛋白與RNA相互作用的結合位點。二、技術原理CLIP技術利用紫外線照射使細胞內的RNA與RNA結合蛋白(RBP)發生共價交聯,隨后通過免疫沉淀的方法富集與特定RBP結合的RNA片段,再經過逆轉錄和高通量測序等步驟,獲取RBP在體內的RNA結合位點和結合序列信息。三、應用場景1.蛋白質-RNA相互作用研究:確定特定蛋白質在體內的RNA結...
一、技術簡介RIP(RNAImmunoprecipitation,RNA免疫沉淀)技術是一種用于研究細胞內RNA與蛋白質相互作用的關鍵實驗方法,能夠揭示RNA結合蛋白(RBP)在轉錄后調控中的功能機制。二、技術原理RIP利用針對目標蛋白的抗體把相應的RNA-蛋白復合物沉淀下來,通過分離純化,對結合在復合物上的RNA進行RT-PCR驗證或測序分析,結果更具生物學說服力。三、應用場景1.基礎機制:解析RNA結合蛋白(如AGO2、Polycomb復合物)的功能及RNA調控網絡。2....
一、技術簡介ChIP(染色質免疫共沉淀)是一種研究蛋白質與DNA相互作用的關鍵技術,廣泛應用于轉錄因子結合位點鑒定、表觀遺傳修飾分析等領域。二、技術原理利用抗原抗體的特異性結合,將與目的蛋白相結合的DNA片段沉淀下來,能夠真實地反映結合在DNA序列上的調控蛋白。三、應用場景1.轉錄調控研究:鑒定轉錄因子(如p53、NF-κB)的DNA結合位點。2.表觀遺傳學:分析組蛋白修飾(如H3K27me3)在基因沉默中的作用。3.疾病機制:探索癌癥中異常蛋白(如MYC)的基因組結合模式。...
一、技術簡介IP(免疫沉淀,Immunoprecipitation)和Co-IP(免疫共沉淀,Co-Immunoprecipitation)是研究蛋白質功能及相互作用的核心技術,廣泛應用于分子生物學和細胞生物學領域。二、技術原理IP通過特異性抗體與目標蛋白結合,利用抗體將靶標蛋白(即抗原)分離出來,從而檢測某一種蛋白的表達情況;而CO-IP是在IP基礎上,驗證蛋白質間的相互作用。通過捕獲一個蛋白(誘餌蛋白),檢測與其結合的互作蛋白(靶蛋白),從而特異性富集所研究的目的蛋白,進...
在細胞生物學研究、生物制藥等前沿領域,細胞培養基為細胞生長繁衍提供關鍵養分與適宜環境。掌握其正確使用方法,才能讓細胞蓬勃生長,助力科研突破與產業革新。開啟培養前,依據細胞種類、實驗目的篩選培養基,如貼壁生長的癌細胞系多用含血清、葡萄糖、氨基酸及多種生長因子的RPMI-1640培養基;原代細胞培養常選營養成分豐富、成分貼近體內環境的DMEM培養基,且需添加適量抗生素,像青霉素、鏈霉素,防止微生物“偷襲”,搭建安全“保育箱”。配制環節嚴格按說明書稱取培養基粉末,溶解于超純水中,用...
原代心肌細胞間質并非單一物質,而是由多種成分巧妙交織而成的復雜網絡。其中,膠原蛋白是極為重要的組成部分。它如同堅韌的繩索,為心肌細胞提供穩固的支撐框架。在心臟每一次有力的搏動中,膠原蛋白承受著巨大的機械應力,確保心肌細胞不會因過度拉伸或扭曲而受損,維持著心臟結構的完整性,使其能夠在漫長的生命周期中持續穩定地工作。彈性纖維也在其中扮演著重要角色。它們賦予心肌組織一定的彈性和回縮力。當心臟收縮時,彈性纖維被拉伸儲存能量;而當心臟舒張時,又能釋放能量輔助心臟恢復到原來的形狀,讓心臟...
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